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　　BUNSEN資訊| 牛血清的介紹和概述

　　牛血清是動(dòng)物血清中的一種，是細(xì)胞培養(yǎng)中重要的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份，也是一種常用的生物化學(xué)試劑，有著廣泛的應(yīng)用。由于牛本身是大型動(dòng)物，在研究上具有操作便捷性，收獲效率高等優(yōu)點(diǎn)，故牛血清行業(yè)應(yīng)用非常普遍。

　　牛血清常分為胎牛血清，新生牛血清，小牛血清，成牛血清。

　　牛血清通常含有一定比例的蛋白質(zhì)、糖類、礦物質(zhì)和維生素;而成牛血清常被用作酸堿調(diào)節(jié)劑、細(xì)胞穩(wěn)定性外源調(diào)節(jié)劑和促進(jìn)修復(fù)和重組等。

　　【胎牛血清】(Foetal Bovine Serum，簡(jiǎn)稱FBS)：是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。此時(shí)胎牛各臟器正處生長(zhǎng)分化階段，血中含有豐富的生長(zhǎng)發(fā)育因子，非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng)，一旦胚胎發(fā)育這些因子自動(dòng)消失。因此8個(gè)月胎齡以上的牛胚胎，已接近足月，不能作為胎牛血清的原料來(lái)使用。

　　【新生牛血清】(Newborn Calf Serum，簡(jiǎn)稱NBCS)：0—7天內(nèi)(也有說(shuō)法是0—30天內(nèi));

　　【小牛血清】(Calf Serum)：采自出生30天至1年的小牛。

　　【成牛血清】(Adult Bovine Serum，簡(jiǎn)稱ABS)：采自成年牛收全血后分離得到血清。

　　怎樣篩選合適的胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中一個(gè)非常關(guān)鍵的步驟，首先，將產(chǎn)品測(cè)定其pH值，非常重要，要保持在7.4至7.6的pH范圍內(nèi);接下來(lái)，要檢查有效成分， 檢查其中的細(xì)胞因子、培養(yǎng)基添加劑和免疫抑制因子的質(zhì)量水平;最后，細(xì)胞存活率的測(cè)定也很重要，由于內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡，對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果影響較大，且不同批次的血清，內(nèi)毒素差異又不易控制，牛血清的質(zhì)量越高，細(xì)胞的生存率和能力也越高，可以替代部分試劑中添加的有機(jī)物。

　　內(nèi)毒素含量越低，級(jí)別越高，以胎牛血清為例：

　　血清中內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時(shí)，此血清為特級(jí)胎牛血清;

　　血清中內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml，≤ 25EU/ml時(shí)，此血清為優(yōu)級(jí)胎牛血清;

　　血清中內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時(shí)，此血清為標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清;

　　胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用：

　　1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物，以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。

　　2.提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

　　3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。

　　4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。

　　5.起酸堿度緩沖液作用。

　　6.提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害。

　　7.參與細(xì)胞凍存。

　　在細(xì)胞培養(yǎng)中，胎牛血清加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度大多為5%～20%(最常見(jiàn)為10%)的。具體到不同試驗(yàn)，應(yīng)依據(jù)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)，或細(xì)胞類型或基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成分來(lái)確定相應(yīng)濃度。胎牛血清應(yīng)在-20℃儲(chǔ)存，運(yùn)輸應(yīng)干冰冷鏈運(yùn)輸，避免反復(fù)凍融，確保血清中因子活性不受影響，保證血清優(yōu)良品質(zhì)

　　儲(chǔ)存條件：-20°C凍存。

　　胎牛血清解凍后，應(yīng)按單次習(xí)慣用量分裝，分裝后的血清仍-20°C凍存。

　　若置于4°C的血清，應(yīng)在一周內(nèi)用完，用量頻率少推薦使用EvaCell免分裝50ml的規(guī)格哦

　　血清和培養(yǎng)基的配制，應(yīng)遵循“現(xiàn)用現(xiàn)配"原則，保證更好的細(xì)胞培養(yǎng)效果。配好的培養(yǎng)液，應(yīng)于一周內(nèi)用完。

　　血清避免反復(fù)凍融，避免在4°C或更高溫度儲(chǔ)存過(guò)久，否則會(huì)破壞血清中有效活性成分和被污染，影響血清品質(zhì)。

　　血清融化注意：

　　在水浴過(guò)程中，血清的平面要浸在水中。在融化過(guò)程中要慢慢搖動(dòng)瓶身，使血清混勻，但搖動(dòng)中盡量不要產(chǎn)生泡沫!

　　胎牛血清使用說(shuō)明：血清從-20℃取出后，融化，按推薦體積加入到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，混勻，制備成新鮮培養(yǎng)基(整個(gè)操作需在無(wú)菌超凈臺(tái)中進(jìn)行，注意無(wú)菌操作)。配制好的培養(yǎng)基推薦在4℃保存，應(yīng)在1周內(nèi)用完。

　　關(guān)于熱滅活：胎牛血清不推薦熱滅活。

　　熱滅活一般是指在做免疫相關(guān)的試驗(yàn)中，通過(guò)加熱滅活掉血清中的補(bǔ)體，以避免對(duì)免疫試驗(yàn)的影響。

　　在胎牛血清中，由于胎齡原因，尚未形成完整的補(bǔ)體系統(tǒng)，因此，胎牛血清不會(huì)真正干預(yù)免疫試驗(yàn)。故不需滅活。

　　并且，熱滅活反而可能導(dǎo)致胎牛血清中部分重要的生長(zhǎng)因子的活性衰減，進(jìn)而影響細(xì)胞培養(yǎng)效果。

　　若針對(duì)某些特殊試驗(yàn)，對(duì)于胎牛血清一定要做熱滅活，國(guó)際上推薦熱滅活的方法：40℃水浴,20min。

　　BUNSEN本生胎牛血清優(yōu)勢(shì)：

　　1 全球有的血清來(lái)源，批次穩(wěn)定

　　2 提供細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)，專業(yè)老師指導(dǎo)，養(yǎng)細(xì)胞更放心。

　　3 新批次在試用前，提供試用服務(wù)，養(yǎng)細(xì)胞更放心

　　4 千萬(wàn)個(gè)血清用戶細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)，為各種細(xì)胞培養(yǎng)提供問(wèn)題梳理分析，解決方案

　　5 售后無(wú)憂，從簽收日開(kāi)始計(jì)算，有效期1年，血清在妥善保管、未開(kāi)封未融化、且不影響二次銷售的情況下，均可享受無(wú)條件退貨或換貨的售后保障。

　　牛血清本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。